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細(xì)胞流式檢測(cè):給細(xì)胞貼上“身份標(biāo)簽”
發(fā)布時(shí)間: 2026-01-28 點(diǎn)擊次數(shù): 10次在現(xiàn)代生命科學(xué)研究中,科學(xué)家們常常需要同時(shí)分析成千上萬(wàn)個(gè)細(xì)胞的多種特性,如大小、內(nèi)部結(jié)構(gòu)和特定蛋白的表達(dá)水平。細(xì)胞流式檢測(cè)(FlowCytometry)技術(shù)應(yīng)運(yùn)而生,它如同一臺(tái)高速“細(xì)胞掃描儀”,讓研究者能夠精確、高通量地解析復(fù)雜的細(xì)胞群體。??工作原理流式細(xì)胞儀的工作流程可概括為“排隊(duì)、照射、計(jì)數(shù)”:單細(xì)胞懸液制備:通過(guò)酶消化、過(guò)濾等方法獲得單細(xì)胞懸液,并去除細(xì)胞團(tuán)塊和雜質(zhì)。熒光標(biāo)記:使用熒光染料或特異性抗體標(biāo)記細(xì)胞。例如,用DAPI標(biāo)記細(xì)胞核,用熒光抗體標(biāo)記特定蛋白。鞘流聚焦:細(xì)胞懸液在鞘液的包裹下,以單列形式通過(guò)檢測(cè)區(qū),確保逐個(gè)通過(guò)激光束。信號(hào)采集:當(dāng)細(xì)胞通過(guò)激光束時(shí),會(huì)產(chǎn)生散射光(前向散射光FSC反映細(xì)胞大小,側(cè)向散射光SSC反映細(xì)胞內(nèi)部復(fù)雜度)和熒光信號(hào)。探測(cè)器將這些光信號(hào)轉(zhuǎn)換為電信號(hào)。數(shù)據(jù)分析:計(jì)算機(jī)軟件根據(jù)信號(hào)的強(qiáng)度和分布,生成散點(diǎn)圖和直方圖,從而對(duì)細(xì)胞進(jìn)行分群和定量分析。??主要應(yīng)用場(chǎng)景細(xì)胞流式檢測(cè)的應(yīng)用極為廣泛:免疫學(xué)研究:分析外周血、淋巴組織中各類(lèi)免疫細(xì)胞(T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞等)的比例和功能狀態(tài)。腫瘤學(xué):檢測(cè)腫瘤細(xì)胞表面標(biāo)志物,用于腫瘤分型、微小殘留病(MRD)監(jiān)測(cè)和免疫治療療效評(píng)估。干細(xì)胞與發(fā)育生物學(xué):鑒定和分選不同發(fā)育階段的干細(xì)胞和祖細(xì)胞。細(xì)胞周期與凋亡分析:通過(guò)特定染料評(píng)估細(xì)胞周期進(jìn)程和細(xì)胞凋亡情況。功能與藥物篩選:研究藥物對(duì)細(xì)胞增殖、凋亡、信號(hào)通路等的影響。??技術(shù)特點(diǎn)與發(fā)展流式細(xì)胞術(shù)具有高通量、多參數(shù)、高速度和高精度的特點(diǎn)。近年來(lái),隨著技術(shù)的發(fā)展,流式細(xì)胞儀的性能不斷提升:多色分析:可同時(shí)檢測(cè)十幾種甚至幾十種熒光信號(hào),極大豐富了信息維度。高參數(shù)流式:通過(guò)增加檢測(cè)參數(shù),更精細(xì)地解析細(xì)胞亞群。質(zhì)譜流式(CyTOF):用金屬同位素代替熒光染料,突破了熒光光譜重疊的限制,可實(shí)現(xiàn)上百個(gè)參數(shù)的檢測(cè)。成像流式:在獲取散射光和熒光信號(hào)的同時(shí),提供細(xì)胞圖像,兼顧形態(tài)與功能信息。

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